产品货号:
KD2041
中文名称:
D-荧光素钠盐
英文名称:
D-Luciferin sodium salt
产品规格:
25mg|100mg|500mg
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
CAS号:103404-75-7
分子式:C11H7N2NaO3S2
分子量:302.3
纯度:≥99%
保存:-20℃
产品说明:
D-荧光素(D-Luciferin)是萤火虫荧光素酶底物,其量子效率为0.88,是Luminol的20倍。反应原理为镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用,用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。也应用于体外分析,高通量测序和各种污染检测。
D-荧光素有三种产品形式,D-荧光素(D-Luciferin,free acid)、D-荧光素钾盐(D-Luciferin,potassium salt)和D-荧光素钠盐(D-Luciferin,sodium salt),三种形式都易溶于水,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。它们的激发和发射波长分别为328nm和533nm。
使用方法(仅供参考):
(一)活体成像分析方法
1.用DPBS(不含Mg2+、Ca2+)配制15mg/mL的D-Luciferin工作液,0.2μm滤膜过滤除菌。
2.注射量10μL/g的体重,如10g重小鼠,注射100μL工作液(1.5mg D-Luciferin)。
3.腹腔注射10~15分钟后,上机进行图像分析。
(二)体外分析方法
1.用无菌水配置200×的D-Luciferin储备液(30mg/mL),立即使用,或-20℃保存。
2.用预热好的完全培养基1:200稀释D-Luciferin储备液,配制150μg/mL工作液。
3.去除细胞培养基。
4.向细胞中添加1×的D-Luciferin工作液,37℃孵育5~10min,进行图像分析。
注意事项:
1.钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性,镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响,溶解D-Luciferin应使用无钙镁离子的PBS,且要完全溶解。
2.本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。
3.动物类型体重,以及注射方式都会影响信号的发射,建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
4.在体外图像分析前,将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度。
5.进行ATP的检测,尽量避免外源ATP的污染。
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